Agrobacterium radiobacter'den Pektin Liyaz Enziminin Üretilmesi, Saflaştırılması, Karakterize Edilip Meyve Suyu Üretiminde Kullanılması

Ekstraselüler pektin liyaz enzimi (EC 4.2.2.10) Agrobacterium radiobacter'den katı ortam fermantasyonu ile üretilmiş ve DEAE-selüloz iyon değişim kromatografisi kullanılarak 21 kat saflaştırılıp karakterize edilmiştir. Enzimin molekül ağırlığı Sephadex G-100 jel filtrasyon kromatografisi ile 67 kDa olarak bulunmuş ve enzimin saflığı SDS-PAGE ile kontrol edilmiştir. Enzimin optimum pH'sı ve sıcaklığı sırasıyla 8 ve 60°C olarak belirlenmiştir. Enzim aktivitesinin 24 saat boyunca kararlı olduğu en yüksek sıcaklığın 40°C'de olduğu gözlenmiştir. 50°C'de yaklaşık 4 saat boyunca, 60°C'de ise 1 saat boyunca %50 aktivitesini koruduğu bulunmuştur. Saflaştırılan enzimin Vmax ve KM'si Lineweaver-Burk grafiği kullanılarak 4.36 mg/mL and 303 µmol/L.dakika olarak hesaplanmıştır. Pektin liyaz enziminin aktivitesi üzerine metal iyonlarının etkisi incelenmiş ve Mg2+ ve Ca2+ iyonlarının enzimi kısmen, Fe3+, Zn2+, Cu2+ ve Hg2+ iyonlarının enzimi tamamen inhibe ettiği anlaşılmıştır. Co2+ (0,1 mM, 1 mM ve 10 mM) iyonunun ise enzimin az da olsa aktivitesini arttırdığı gözlenmiştir. Saflaştırılıp karakterize edilen enzim meyve suyu üretiminde kullanıldığında kontrole göre meyve suyu veriminde önemli artış görülmüştür.